[00891911]牛泡沫病毒(BSV)反式激活因子的克隆及功能分析
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技术详细介绍
对泡沫病毒（foamy viruses，FVs）进行研究，以自主分离的牛泡沫病毒中国毒株BFV3026为材料，克隆病毒反式激活因子tas基因并进行了序列分析。在E.coli中合成并纯化了Tas蛋白，证实Tas蛋白是BFV的反式激活因子，并发现完整的Tas蛋白可跨越活细胞的质膜进入细胞内部发挥其功能。克隆到具有完整活性的BFV LTRs和IP启动子，并构建了系列缺失型报道质粒。首次界定了BFV基因组中TRE的位置和范围，对BFV TRE进行了性质分析并阐明了LTR RU5区对Tas激活的抑制作用。证实BFV与BIV的共感染能加速BIV感染的胎牛肺细胞的死亡，首次报道BFV编码的Tas蛋白能单独或协同激活BIV的LTR，通过缺失实验将介导Tas激活作用的靶序列TRE BIV定位于BIV LTR -410nt ～-115nt之间，但NF-kB位点及TAR序列均不参与Tas的激活作用。