[00971564]以杆状病毒表达系统为技术平台研究药用重组蛋白质
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技术详细介绍
应用多种杆状病毒转移载体，建立了由ACNPV-Sf9和BmNPV家蚕两种表达系统构成的技术平台。优化了基因重组和表达条件，实现了在家蚕幼虫中高效表达外源基因，建立了从家蚕血淋巴中去除酪氨酸氧化酶和色素氧化干扰，分离纯化重组蛋白的有效方法。创造了用异源的ACPNPV转移载体直接构建重组BmNPV，高铲表达重组蛋白的新技术，从而使各种ACPNPV转移载体可直接用于家蚕表达系统，为家蚕系统开辟了广阔的应用前景。在国际上首次报告了用家蚕幼虫高效表达rhM-CSF、rhGM-CSF、rhSCF等重要生长因子和重组人丁酰胆碱酯酶（rhBChE），用Sf9细胞表达了rhPON1及新型的高活性rdhSCF（二连体人干细胞因子。上述重组蛋白药效明确，技术条件成熟，已取得的成果为这些重组蛋白进一步转化为新药生产提供了重要的理论指导和良好的技术基础。