[01271126]杂色云芝漆酶基因在甲醇毕赤酵母中的异源表达及应用研究

利用分子生物学的手段，采用pMETA和pMET A新型表达载体，实现了杂色云芝漆酶基因在甲醇毕赤酵母P. methanolica PMAD16中的异源表达，构建并筛选出了遗传稳定的基因工程菌。

改变传统转换培养基诱导，采用直接诱导法，基因工程菌采用BMDY培养基，利用发酵罐（5L以上）进行放大培养，确定出了最佳的发酵工艺路线，提高了漆酶活力，发酵液酶活达12600U/L以上。

对漆酶进行了分离纯化，研究了其酶学性质，漆酶浓缩产品酶活达到30000U/L以上。

开发研究了漆酶的应用，利用重组漆酶对人参总皂甙的提取进行了研究，达到了其降解木质素提高功效成分提取率的目的；并对重组漆酶进行降解有机污染物（2-氯苯酚）和染料脱色（蒽醌染料）的研究，确定了最佳反应条件，应用效果显著，为以后漆酶的应用提供了理论基础。

申报了1项发明专利。

在合同期间（2007～2009年）发表了6篇高水平论文，其中SCI收录1篇，4篇核心期刊，1篇全国会议论文。

该研究前期（2003～2006年）发表论文8篇，其中SCI收录2篇，核心期刊4篇。

该研究共发表论文14篇，SCI收录3篇。