[01328830]放线菌液态发酵产纤溶酶的分离纯化和酶学性质研究

血栓栓塞性疾病严重危害人类生命和健康，溶栓疗法效果显著。

现有的溶栓药物存在价格高，溶栓的同时可能存在引起体内出血等副作用，因此，新型高效、安全的溶栓药物的开发需求迫切。

该成果来源于黑龙江省教育厅于2012年批准的科研项目《放线菌液态发酵产纤溶酶的分离纯化和酶学性质研究》，项目编号为12521598。

该成果以放线菌YY21为生产菌株，采用液态发酵方法生产纤溶酶，对纤溶酶的分离纯化方法和酶学性质进行了研究。

经过大量研究确定了放线菌纤溶酶的纯化方法，发酵液依次经过硫酸铵分级盐析、Octyl-sepharose FF和Phenyl-sepharose HP疏水相互作用后得到高纯度的纤溶酶。

采用现代酶学分析手段确定了纤溶酶的酶学性质，酶分子量约为32kDa，是一种糖蛋白，含糖量约0.7266%（w/v），可在短时间内降解人血纤维蛋白原，对一定范围内温度和pH的变化不敏感，反复冻融对酶活力影响较小，属于丝氨酸蛋白酶类。

该成果创新性的采用两步疏水相互作用色谱纯化了放线菌纤溶酶，提高了其活性回收率和纯化倍数。

目前该成果处于实验室研究阶段，在后续将开展小试规模的研究工作，并确定该纤溶酶在动物体内及体外的溶栓效果。