本发明属于生物工程技术领域,涉及工业微生物的育种,尤其是构建一种高产丁酸乙酯酿酒酵母菌株的方法及其应用。
通过在出发菌株中过表达乙酰辅酶A酰基转移酶基因Erg10、3‑羟基丁酰辅酶A脱氢酶基因Hbd、3‑羟基丁酰辅酶A脱水酶基因Crt、反式‑2‑烯酰辅酶A还原酶基因Ter、以及醇酰基转移酶基因AAT,以获得一株具有产丁酸乙酯能力的酵母菌株EST,与出发菌不产丁酸乙酯相比,其丁酸乙酯产量达到了77.33±3.79mg/L。
在对Ter基因和AAT基因进行二拷贝表达后获得菌株EDST,丁酸乙酯的产量达到了99.65±7.32mg/L,与EST菌株相比产量提高了28.9%,同时还产生了40.93±3.18mg/L的巴豆酸乙酯,取得了预料不到的技术效果,为酿造出风味优良且更有利于健康的白酒奠定了理论基础,具有广阔的市场前景。
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