[00826728]可溶性鸡蛋壳膜蛋白与多肽的制备及其抗氧化活性的研究

该课题来自于农业部948项目、科技部十一五支撑项目和企业横向委托项目。中国是产蛋大国，鸡蛋的消费量巨大，有多达30%以上的鸡蛋被用作其它加工食品的原料，由此而产生的鸡蛋壳被大量堆积。壳膜的开发利用前景广阔。首次测定了鸡蛋壳膜的基本成分，建立了可溶性鸡蛋壳膜蛋白“二次提取法”工艺，提取率达93.62%。进行了可溶性鸡蛋壳膜蛋白相关性质的全面测定，发现鸡蛋壳膜蛋白中含有Ⅰ型胶原，此法制备的胶原较大程度地保留了三股螺旋结构，CD图谱分析表明制备的鸡蛋壳膜蛋白具有较完整的蛋白质二级结构，具有良好的吸水性、保水性、乳化性和起泡性。形成了鸡蛋壳膜蛋白酶解工艺技术，建立了化学发光法系统测定蛋膜蛋白及其酶解液抗氧化活性方法。筛选出碱性蛋白酶酶解蛋膜蛋白具有较高的抗氧化活性，采用化学发光法优化了碱性蛋白酶酶解鸡蛋壳膜蛋白制备抗氧化肽的工艺条件，测定了鸡蛋壳膜肽的清除O2-、OH及对DNA损伤保护的能力，其半抑制浓度(IC50)分别为0.157mg/mL、0.215mg/mL及1.128mg/mL。发现鸡蛋壳膜肽具有很强的抗氧化活性。采用凝胶排阻色谱将碱性蛋白酶酶解液分离出三个组分SP1、SP2、SP3。化学发光法测定了各组分的O2-清除率，发现分子量为618Da左右的蛋膜蛋白肽(组分SP2)具有最强的抗氧化活性，其高抗氧化活性主要来自于疏水性氨基酸、酸性氨基酸和抗氧化性氨基酸。研究发现了壳膜蛋白肽抗氧化的“量-效关系”和“效应饱和”现象。该技术已进入中试阶段，具有可靠的成熟度，不存在安全性问题。该技术不受地域、气候、风俗等因素的影响，具有一定规模的鸡蛋生产企业都可以推广应用。